Клонирование и анализ генов легких цепей иммуноглобулинов стерляди 
Äàííûå
î
íóêëåîòèäíûõ
ïîñëåäîâàòåëüíîñòÿõ
èç ðàçíûõ
ëîêóñîâ
âûÿâèëè
íèçêóþ
ãåòåðîãåííîñòü
ãåíîâ (85-95%), ÷òî
óêàçûâàåò
íà
îòñóòñòâèå
ñîìàòè÷åñêîãî
ìóòàãåíåçà
(Rast et al., 1994).
Êîñòèñòûå
ðûáû.
Àíàëèç
ñûâîðîòî÷íûõ
àíòèòåë
ïåùåðíîãî ñîìèêà
(Ictalurus punctatus) ïîêàçàë
íàëè÷èå
òðåõ òèïîâ
L-öåïåé ñ
ðàçëè÷íûìè
ìîëåêóëÿðíûìè
ìàññàìè: 26, 24 è 22
êÄà. Äâà âèäà
àíòèòåë
ìûøè, 3F12 è 1G7,
çàõâàòûâàþò
áîëåå 90% îò
îáùåãî
êîëè÷åñòâà
èììóíîãëîáóëèíîâ
â ðåàêöèè
èììóíîïðåöèïèòàöèè.
Ïðè ýòîì 3F12
àíòèòåëà
ñâÿçûâàþòñÿ
ñ
ìîëåêóëàìè, ñîäåðæàùèìè
L-öåïè ìàññîé
24 è 22 êÄà, à 1G3
àíòèòåëà ñ
äðóãîé
ñóáïîïóëÿöèåé,
ñîäåðæàùåé
L-öåïè ìàññîé
26 êÄà. Íà
îñíîâå ýòèõ
äàííûõ L-öåïè
ðàçäåëÿþò íà
äâà êëàññà,
íàçûâàåìûå F
è G (Lobb et al.,1984).
Ãåíîìíàÿ
îðãàíèçàöèÿ
ëîêóñà
L-öåïåé G òèïà
èìååò
êëàñòåðíûé
òèï (ðèñ. 5). Â
êàæäîì êëàñòåðå
ñîäåðæèòñÿ
ïî îäíîìó J è C
ñåãìåíòó è äâà
V ñåãìåíà.
Âàðèàáåëüíûå
ãåííûå
ñåãìåíòû
ðàñïîëîæåíû
âñåãäà â
ïðîòèâîïîëîæíîé
òðàíñêðèïöèîííîé
ïîëÿðíîñòè ê J
è C ñåãìåíòàì
. Â ðÿäå
ãåíîìíûõ
êëîíîâ îäèí V
ñåãìåíò ðàñïîëàãàëñÿ
ñ 3' ñòîðîíû îò
C ãåííîãî
ñåãìåíòà.
Ðàçìåð
êëàñòåðà
ðàâåí
ïðèìåðíî 3
òïí,
ðàññòîÿíèå
ìåæäó êëàñòåðàìè
îêîëî 6 òïí (Ghaffari and Lobb,
1993; Bengten, 1994).
Õîòÿ
ãåíû L-öåïåé
ñîìèêà
èìåþò
íèçêóþ ãîìîëîãèþ
ñ ãåíàìè
äðóãèõ
ïîçâîíî÷íûõ
(40-50% ïî íóêëåîòèäíîé
ïîñëåäîâàòåëüíîñòè),
èõ ìîæíî
îòíåñòè ê
êàïïà òèïó
âûñøèõ
ïîçâîíî÷íûõ,
òàê êàê
ñõîäñòâî ïî
ïåðâè÷íîé
ñòðóêòóðå ñ
ëÿìáäà
òèïîì íèæå.
Êðîìå òîãî,
êîíôèãóðàöèÿ
ñïåéñåðîâ
èìååò
õàðàêòåð
êàïïà òèïà: 12
ïí ñïåéñåð
àññîöèèðîâàí
ñ V, 23 ïí ñïåéñåð
ñ J
ñåãìåíòîì (Ghaffari
and Lobb, 1993).
Ó
ðàäóæíîé
ôîðåëè (Oncorhynchus mykiss),
ïðåäñòàâèòåëÿ
äðóãîãî
ñåìåéñòâà
êîñòèñòûõ
ðûá, òàêæå
îáíàðóæåíû
äâà òèïà L
öåïåé (Daggfeldt et al., 1993).
Îäèí èç íèõ (L1)
âûñîêîãîìîëîãè÷åí
G òèïó ñîìèêà
ïî ñòðóêòóðå
V è C îáëàñòåé
è ñîîòâåòñòâóþùèé
ëîêóñ èìååò
ñõîäíóþ
îðãàíèçàöèþ.
Ïî-âèäèìîìó,
ó ýòèõ âèäîâ
îáúåäèíåíèå
V è J ñåãìåíòîâ
ïðîèñõîäèò
òîëüêî çà
ñ÷åò èíâåðñèé
ñ
âîññòàíîâëåíèåì
åäèíîé
ïîëÿðíîñòè
òðàíñêðèïöèè.
Ðàçíîîáðàçèå
âàðèàáåëüíûõ
äîìåíîâ
îáðàçóåòñÿ
â ðåçóëüòàòå
êîìáèíàòèâíîãî
ñî÷åòàíèÿ V è
J ñåãìåíòîâ â
ïðåäåëàõ
îäíîãî êëàñòåðà.
Íå
èñêëþ÷àåòñÿ,
÷òî â
ïåðåñòðîéêè
ìîãóò
âîâëåêàòüñÿ
è ñîñåäíèå
êëàñòåðû.
Èíòåðåñíîé
îñîáåííîñòüþ
êîñòèñòûõ
ðûá ÿâëÿåòñÿ
î÷åíü
âûñîêàÿ
ïðîïîðöèÿ
ìÐÍÊ, ïðåäñòàâëÿþùåé
òàê
íàçûâàåìûå
ñòåðèëüíûå
òðàíñêðèïòû
(Ghaffari and Lobb, 1993). Ýòè
òðàíñêðèïòû
âêëþ÷àþò â
ñåáÿ òîëüêî
Ñ-ñåãìåíòû è
ôëàíêèðóþùèå
èõ 5’è
3’-íåòðàíñëèðóåìûå
ó÷àñòêè.
Êîëè÷åñòâî
ñòåðèëüíûõ
òðàíñêðèïòîâ
ó ñîìèêà è
ôîðåëè â 5 ðàç
ïðåâûøàåò
êîëè÷åñòâî
ïîëíûõ
VJC-òðàíñêðèïòîâ.
Ðèñ.
5. Ãåíîìíàÿ
îðãàíèçàöèÿ
ëîêóñà
ãåíîâ L-öåïåé
ÈÃ ó ïåùåðíîãî
ñîìèêà.
Ãåííûå
ñåãìåíòû
îðãàíèçîâàíû
â êëàñòåðû.
Êàæäûé
êëàñòåð
ñîäåðæèò äâà
VL è ïî
îäíîìó JL è CL
ñåãìåíòó è
èìååò
ðàçìåð îêîëî 5
òïí. Ðàññòîÿíèå
ìåæäó JL è CL
îêîëî 1000 ïí, VL
ñåãìåíòû
óäàëåíû îò 5'
êîíöà JL
ñåãìåíòà íà
3 òïí. VL
ñåãìåíòû
âñåãäà
ðàñïîëîæåíû
â ïðîòèâîïîëîæíîé
òðàíñêðèïöèîííîé
ïîëÿðíîñòè
ïî îòíîøåíèþ
JL è CL
ñåãìåíòàì
(Ghaffari and Lobb, 1993).
Àìôèáèè.
Ó
øïîðöåâîé
ëÿãóøêè (Xenopus laevis)
âûÿâëåíî òðè
ñåìåéñòâà
ãåíîâ L-öåïåé
ÈÃ, êîäèðóþùèõ
òðè
ðàçëè÷íûõ
èçîòèïà: L1 (ðî), L2
(ñèãìà) è L3 (ðèñ.
6).
Âñå
òðè ëîêóñà
èìåþò
ñåãìåíòàðíûé
õàðàêòåð
îðãàíèçàöèè.
L1 ëîêóñ
ñîäåðæèò
ìíîæåñòâåííûå
VL1 ñåãìåíòû,
ðàçäåëåííûå
â ãåíîìå 2.1 - 3.6
òïí, ïÿòü JL1
ñåãìåíòîâ,
òðè èç
êîòîðûõ
èäåíòè÷íû, è
îäèí CL1
ãåííûé
ñåãìåíò (Stewart et al., 1993).
JL1 è VL1
ñåãìåíòû
ôëàíêèðóþòñÿ
êàíîíè÷åñêèìè
ãåïòà- è
íîíàìåðíûìè
ñèãíàëüíûìè
ïîñëåäîâàòåëüíîñòÿìè,
ðàçäåëåííûìè
12 ïí ó VL1 è 23 ïí ó JL1
ñåãìåíòîâ (Sakano et
al., 1980).
Страницы: 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17
|
|
