Клонирование и анализ генов легких цепей иммуноглобулинов стерляди
Â
ïðîöåññå
ðàçâèòèÿ
Â-ëèìôîöèòà
â êðîâåòâîðíûõ
îðãàíàõ
îäèí èç V
ñåãìåíòîâ
ñîåäèíÿåòñÿ
ñ îäíèì èç J
ñåãìåíòîâ
ïîñðåäñòâîì ñàéòñïåöèôè÷åñêîé
ðåêîìáèíàöèè
(Schatz et al., 1992). Â ýòîò
ïðîöåññ
âîâëåêàþòñÿ
ñïåöèàëüíûå îëèãîìåðíûå
ïîñëåäîâàòåëüíîñòè:
ãåïòà- è
íîíàìåðû,
ôëàíêèðóþùèå
ñ 3' ñòîðîíû V
ñåãìåíò è ñ 5'
ñòîðîíû J
ñåãìåíò (ðèñ.
3) (Aguilera et al., 1987; Hesse et al., 1989). Îòëè÷èòåëüíîé
îñîáåííîñòüþ
ëÿìáäà è
êàïïà ëîêóñîâ
ÿâëÿåòñÿ
êîíôèãóðàöèÿ
ïðîìåæóòêîâ
ìåæäó ãåïòà-
è
íîíàìåðàìè,
íàçûâàåìûõ ñïåéñåðàìè.
Ñ V è J ãåííûìè
ñåãìåíòàìè
ëÿìáäà òèïà
àññîöèèðîâàíû
23 ïí è 12 ïí
ñïåéñåðû ñîîòâåòñòâåííî,
à ñ V è J
ñåãìåíòàìè
êàïïà òèïà - 12
ïí è 23 ïí
ñïåéñåðû (Durdik et al., 1984;
Stavnezer et al., 1985).
ë
Ðèñ. 2.
Ñõåìà
ñòðîåíèÿ
ëÿìáäà è
êàïïà ëîêóñîâ
ãåíîâ L-öåïåé
Èà ÷åëîâåêà.
Ëÿìáäà
ëîêóñ
ñîäåðæèò
ìíîãî Vl
ñåãìåíòîâ è
ñåìü ïàð
áëèçêîðàñïîëîæåííûõ
Jl-Cl.
Òðè èç íèõ
ÿëÿþñÿ
ïñåâäîãåíàìè
(Y).
Êàïïà ëîêóñ
ñîäåðæèò
ìíîãî Vk ïÿòü Jk è
îäèí Ck ãåííûé
ñåãìåíò (Hieter et al., 1981;
Roitt et al., 1993).
Îáîçíà÷åíèÿ:
- ñèãíàëüíûå
îëèãîìåðû.
Ðèñ.
3. Ñõåìà ðàñïîëîæåíèÿ
îëèãîíóêëåîòèäíûõ
ïîñëåäîâàòåëüíîñòåé,
çàäåéñòâîâàííûõ
â ñàéòñïåöèôè÷åñêîé
ðåêîìáèíàöèè
â êàïïà
ëîêóñå ìëåêîïèòàþùèõ.
Ýòè
ïîñëåäîâàòåëüíîñòè
ôëàíêèðóþò
ñ 3‘ ñòîðîíû VL
ñåãìåíò è ñ 5’
ñòîðîíû JL
ñåãìåíò. Âî
âðåìÿ
ðåêîìáèíàöèè
ãåïòàìåð è
íîíàìåð
îäíîãî èç VL
ñåãìåíòà
îáúåäèíÿþòñÿ
ñ
ãåïòàìåðîì
è íîíàìåðîì
îäíîãî èç JL
ñåãìåíòà.
Ýòî äåëàåò
âîçìîæíûì
ñîåäèíåíèå VL
è JL
ñåãìåíòîâ
áåç
íàðóøåíèÿ
ðàìêè
òðàíñëÿöèè
(Aguilera et al., 1987; Hesse et al., 1989).
Îáîçíà÷åíèÿ:
- ñèãíàëüíûå
îëèãîìåðû.
Ïîñëåäîâàòåëüíîñòü,
â êîòîðîé
ðåêîìáèíèðóþò
ëîêóñû
L-öåïåé,
ñòðîãî
óïîðÿäî÷åíà
âî âðåìåíè.
Ïîêàçàíî,
÷òî ïåðâûìè
ïåðåñòðàèâàþòñÿ
ëîêóñû êàïïà
òèïà, ïðè÷åì
åñëè â îäíîé õðîìîñîìå
ïåðåñòðîéêà
îêàçàëàñü
íåôóíêöèîíàëüíîé,
òîåñòü íå
ïðèâåëà ê
ïîÿâëåíèþ
ïîëíîöåííîãî
ãåíà, òî
ðåêîìáèíàöèÿ
ïðîèñõîäèò â
êàïïà ëîêóñå
íà
ãîìîëîãè÷íîé
õðîìîñîìå. Â
ñëó÷àå
ïîâòîðíîé
àáîðòèâíîé
ïåðåñòðîéêè
àíàëîãè÷íî
ïðîèñõîäÿò
ïåðåñòðîéêè
â ëÿìáäà
ëîêóñàõ.
Åñëè â
êëåòêå íåïðîäóêòèâíî
ïåðåñòðîèëèñü
âñå ÷åòûðå ëîêóñà,
òî îíà
ïðåâðàùàòñÿ
â 0-êëåòêó è
ïîäâåðãàåòñÿ
àïîïòîçó.
Åñëè æå ïåðåñòðîéêà
îäíîãî èç
ëîêóñîâ
ïðèâåëà ê îáðàçîâàíèþ
ôóíêöèîíàëüíîãî
ãåíà, òî ðåêîìáèíàöèÿ
îñòàëüíûõ
ëîêóñîâ
áëîêèðóåòñÿ.
Äåòàëè
ìåõàíèçìà
áëîêèðîâàíèÿ
íåèçâåñòíû,
îäíàêî
óñòàíîâëåíî,
÷òî
íåîáõîäèìûì
óñëîâèåì äëÿ
íåãî
ÿâëÿåòñÿ
òðàíñêðèïöèÿ
ïðîäóêòèâíî
ïåðåñòðîåííîãî
ãåíà. Â ðåçóëüòàòå
â êàæäîì
èíäèâèäóàëüíîì
ëèìôîöèòå
ñèíòåçèðóåòñÿ
òîëüêî îäèí
òèï L-öåïåé,
êàïïà èëè
ëÿìáäà, è
ýêñïðåññèÿ
ãåíà ïðîèñõîäèò
òîëüêî íà
îäíîé èç
äâóõ
ãîìîëîãè÷íûõ
õðîìîñîì.
Ýòè
ôåíîìåíû,
íàçûâàåìûå
èçîòèïè÷åñêèì
è àëëåëüíûì
èñêëþ÷åíèÿìè
ëåæàò â
îñíîâå
êëþ÷åâîãî
ïðèíöèïà ôóíêöèîíèðîâàíèÿ
èììóííîé
ñèñòåìû - ïðèíöèïà
êëîíàëüíîé
ñåëåêöèè (Ïîë,
1987; Strob, 1987).
Â
îðãàíèçìå
ìëåêîïèòàþùèõ
ãåíåðèðóåòñÿ
ñâûøå
äåñÿòè
ìèëëèîíîâ
âàðèàíòîâ
àíòèòåë,
õîòÿ â
ãåíîìå
ñîäåðæèòñÿ
çíà÷èòåëüíî
ìåíüøåå
êîëè÷åñòâî
ãåííûõ
ñåãìåíòîâ, êîòîðûå
ìîãóò
ó÷àñòâîâàòü
â ôîðìèðîâàíèè
âàðèàáåëüíûõ
äîìåíîâ. Â
ñëó÷àå
L-öåïåé, îñíîâíûì
èñòî÷íèêîì
ðàçíîîáðàçèÿ
ÿâëÿåòñÿ
êîìáèíàòèâíîå
ñî÷åòàíèå V
è J ñåãìåíòîâ.
Äîïîëíèòåëüíûì
èñòî÷íèêîì
ÿâëÿåòñÿ
ñìåùåíèå
ðåêîìáèíàöèîííîé
ðàìêè â
ìåñòå èõ
ñîåäèíåíèÿ.
Êðîìå òîãî, V ãåííûå
ñåãìåíòû
ìîãóò
îáìåíèâàòüñÿ
ó÷àñòêàìè
ÄÍÊ ñ
ïñåâäîãåíàìè
ïîñðåäñòâîì
ãåííîé
êîíâåðñèè.
Î÷åíü
ñóùåñòâåííûé
âêëàä â
ðàçíîîáðàçèå
ñïåöèôè÷íîñòåé
àíòèòåë
âíîñèò
ñîìàòè÷åñêîå
ìóòèðîâàíèå
âàðèàáåëüíûõ
ãåííûõ
ñåãìåíòîâ â
ñàéòàõ, ó÷àñòâóþùèõ
â
ôîðìèðîâàíèè
àíòèãåíñâÿçûâàþùåãî
öåíòðà.
Ñîìàòè÷åñêîå
ðàçíîîáðàçèå
ãåíåðèðóåòñÿ
ïðè
âòîðè÷íîì
èììóííîì
îòâåòå
ïóòåì
âêëþ÷åíèÿ
ãèïåðìóòàöèîííîãî
ìåõàíèçìà â
êëåòêàõ
ïàìÿòè â çàðîäûøåâûõ
öåíòðàõ
ëèìôàòè÷åñêèõ
óçëîâ (Tonegawa 1983; Roitt et al., 1993).
Страницы: 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17
|
|