Класс жгутиковые: лейшмании, трихомонады, лямблии, трипаносомы

Лямблии

Строение.

Лямблия (Lamblia intestinalis) впервые была описана русским ученым Д. Ф. Лямблем (1859), в честь которого она и получила свое название.

Лямблия существует в виде вегетативной формы (трофозоит) и цисты (рис. 10).

 Вегетативная форма активная, подвижная, грушевидная, передний конец тела закруглен, задний заострен. Длина 9—18 мкм. В передней части тела находится присасывательный диск в виде углубления. Имеет 2 ядра, 4 пары жгутиков. Жгутики, проходя частично в цитоплазме, образуют два хорошо видимых при окраске продольных пучка.

          Рис № 10 Лямблии

При наблюдении в живом состоянии движение очень ха­рактерное, паразит все время переворачивается боком за счет вращательного движения вокруг продольной оси. В препарате при комнатной температуре лямблии быстро погибают. Пищу всасывают всей поверхностью. Размно­жаются продольным делением.

Цисты — это неподвижные неактивные формы паразита. Длина 10—14 мкм. Форма овальная. Оболочка сравнитель­но толстая, хорошо очерчена, часто в значительной своей части как бы отслоена от тела самой цисты. Этот признак помогает отличать цисты лямблий от других сходных образований.

В растворе Люголя окрашиваются в желтовато-коричневатый цвет. Окрашивание позволяет видеть в зрелой цисте 4 ядра.

Цикл развития.

Обитают в верхнем отделе тонкого кишечника. С помощью присасывательного диска прикрепляются к ворсинкам. В желчном пузыре лямблий не живут, так как желчь на них действует губительно. Частое обнаружение их при дуоденальном зондировании объясняется тем, что лямблий попадают в содержимое двенадцатиперстной кишки с ее стенок.

Обычно вегетативные формы с испражнениями не выделяются, однако при поносах их можно обнаружить в свежевыделенных жидких фекалиях. Лямблий, попадая в нижние отделы кишечника, где условия для них неблагоприятные, превращаются в цисты, которые и выделяются обычно с испражнениями.

Цисты хорошо сохраняются во внешней среде, в зависи­мости от влажности и окружающей температуры — до месяца; при высушивании погибают очень быстро.

Заражение может произойти через загрязненные руки, игрушки, пищу и воду. Цисты, попадая в кишечник, превращаются там в вегетативные формы. Одна циста образует две вегетативные формы.

Клиника.

Лямблии распространены очень широко, особенно часто они встречаются у детей. По мнению некоторых ученых, лямблии, особенно при большом их числе, мо­гут вызывать механическое раздражение слизистой оболочки кишечника, в определенной степени затруднять всасыва­ние жиров и жирорастворимых витаминов. При этом могут возникать нерезкие боли в животе, расстройство стула, снижение аппетита, иногда боли в правом подреберье (лямблиоз). В некоторых случаях лямблии могут ухудшить течение других заболеваний кишечника и желчных путей. Ряд ученых считают лямблии непатогенными. Таким образом, вопрос о патогенности лямблии в настоящее время окончательно не решен.

Диагностика.

Обнаружить лямблии у зараженного человека обычно сравнительно легко.

.

Исследование желчи.

Желчь и содержимое двенадцатиперстной кишки, полученные при дуоденальном зондировании, осматривают и выбирают комочки слизи на предметное стекло и микроскопируют. Кроме того, материал центрифугируют, просмат­ривают под микроскопом осадок. Этим методом можно обнаружить вегетативные стадии лямблий. В свежевыделенном  материале, полученном при дуоденальном зондировании, можно обнаружить подвижные вегетативные формы.

Исследование испражнений/

Сбор материала. Фекалии исследуют с целью обнаружения простейших кишечника.

Движение простейших — одно из самых характерных и отличительных свойств, которое позволяет поставить правильный диагноз. Поэтому основное правило, которое необходимо неукоснительно выполнять — это подвергать исследованию только свежий материал. Промежуток времени от момента выделения до исследования не должен превышать 30 мин., т. е. в лабораторию должны доставляться фекалии в теплом виде. Под термином “теплые фекалии” надо пони­мать фекалии, не остывшие после выделения их из организма, но отнюдь не подогретые искусственно. Исследование оформленных испражнений допускается в течение 2 ч после выделения.

Исследуемый материал собирают в чистую сухую посуду. Наиболее подходящими для этой цели являются картонные парафинированные стаканчики, которые после одноразового использования сжигают. Если фекалии собирают в стеклянную или фарфоровую посуду, то перед употреблением ее стерилизуют кипячением.

Вегетативные формы простейших весьма чувствительны к химическим веществам, и если в посуде, куда собирают : фекалии, остаются следы дезинфицирующих веществ, простейшие быстро погибают и распознавание их стано­вится трудным, а иногда и невозможным.

Доставленный в лабораторию материал прежде всего подвергают макроскопическому осмотру. При этом отмечают консистенцию кала, наличие слизи и крови. Если в лабораторию доставлено одновременно несколько проб фе­калий, в первую очередь подлежат исследованию неоформленные фекалии с патологическими примесями/

Сохранять пробу до исследования надо при обычной температуре в вытяжном шкафу. Помещать в термостат не следует, так как при повышенной температуре быстрее происходит размножение бактерий, больше образуется продуктов метаболизма, что приводит к быстрой дегенерации  простейших.

При каждом анализе испражнений с целью обнаружения простейших кишечника обязательным является исследование нативного препарата и мазка, окрашенного раствором Люголя.

Нативный мазок. Жидкие кровянисто-слизистые испражнения без видимой примеси фекальных масс могут быть исследованы без добавления изотонического раствора хло­рида натрия. Деревянной палочкой каплю испражнений переносят на предметное стекло и накрывают покровным стеклом. Пользоваться стеклянными палочками не рекомендуется, так как ими невозможно набирать слизистые ко­мочки, в которых находятся простейшие. Правильно приготовленный препарат должен быть опрятным, покровное стекло должно плотно прилегать к предметному с равномерным распределением жидкости между стеклами без ее выступания за пределы покровного стекла. Мазок должен быть умеренной толщины. Густой мазок малопрозрачен и его трудно микроскопировать, если же взято слишком мало фекалий, то мазок получится разведенным и простейших можно не обнаружить. Через правильно приготовленный мазок должен быть виден печатный текст.

Микроскопическое исследование свежего мазка нужно проводить, обязательно соблюдая следующие правила:

1)                   освещение препарата не должно быть ярким. Правильное освещение достигается соответствующим положением кон­денсора, который опускают тем больше, чем сильнее источник света. Используют также светофильтр;

2)                    препарат про­сматривают сначала под малым увеличением микроскопа (X 10), а потом с сухой системой большого увеличения;

3)                    передвигать препарат надо с таким расчетом, чтобы не пропустить какие-либо участки мазка или не попасть повторно на уже просмотренное место.

При правильном освещении даже под малым увеличением можно увидеть вегетативные стадии и цисты лямблий. После ориентировочного просмотра под малым увеличением обязательно применяют большое увеличение (х10, х40).

Циста в нативном мазке отличается от вегетативной стадии постоянной формой благодаря оболочке. Строение цист в нативном препарате плохо заметно, невидны ядра. Поэтому для уточнения вида применяют мазок, окрашенный раствором 'Люголя.

Окраска раствором Люголя. Раствор Люголя по унифицированной методике рекомендуется следующего состава: йодид калия—3. г, кристаллический йод—'1,5 г, вода дистиллированная — 100 мл. Вначале растворяют йодид калия, затем йод. Раствор стабилен в темной склянке с притертой пробкой при комнатной температуре не более месяца.

Цисты окрашиваются в золотисто-коричневый цвет. На фоне цитоплазмы заметны ядра, их строение и число. Хорошо виден гликоген, окрашивающийся в разные оттенки коричневого цвета.

Методика просмотра препарата, окрашенного раствором Люголя, такая же, как и нативного мазка. Следует учитывать, что при окраске раствором Люголя вегетативные стадии погибают и определяются с трудом.

Так, если фекалии оформленные, то в нативном мазке при микроскопии ( х 400) обнаруживают цисты. Сочетание методов копроскопии и дуоденального зондирования повышает частоту выявления лямблиоза.

Следует отметить, что широкое распространение лямблии (носительство) нередко вводит в заблуждение и вызывает гипердиагностику лямблиоза. Поэтому при наличии клинической картины поражения желудочно-кишечного тракта или желчных путей необходимо исключить другие возможные причины заболевания, например провести бактериологические исследования.

Трихомонады.

Виды.

 У человека обитают три вида трихомонад (рис. 11):Trichomonas hominis— кишечная, обитающая в толстом кишечнике; Trichomonas tenax— ротовая, обитаю­щая в полости рта; Trichomonas vagimalis— влагалищная, паразитирующая в мочеполовых путях.

Рис № 11. Трихомонады

а- трихомонада влагалищная, б- трихомонада кишечная, в- трихомонада ротовая.

Строение.

 Кишечная трихомонада имеет грушевидное тело длиной 8—20 мкм. От переднего конца тела отходят обычно 5 жгутиков.  С одной стороны тела по всей его длине расположена волнообразна; перепонка (ундулирующая мембрана), по наружному краю которой про ходит тонкая нить, выступающая своим свободным концом в виде жгутика. В цитоплазме при окраске видны ядро и осевая нить. Движение трихомонады активное, беспорядочное, “суетливое”.

Наряду с поступательным движением трихомонады вращаются вокруг продольной оси. Мембрану удается заметить только при замедлении движения трихомонады или при ее остановке в виде периодически пробегающих волн по одной из сторон тела. Размножается делением. Цист не образует. Обитает в толстом кишечнике человека. В жидких испражнениях может обнаруживаться в очень больших количествах. В ряде случаев играет определенную роль в развитии или ухудшении течения заболеваний толстого кишечника, особенно у детей раннего возраста.

Ротовая трихомонада по строению похожа на кишечную, ее длина 6—13 мкм, ундулирующая мембрана не достигает конца тела. Цист не образует.

Патогенное значение не доказано, хотя и имеются данные о значительно более частой встречаемости у лиц с различными заболеваниями полости рта и зубов (гингивит, пародонтоз, кариес зубов) и о неблагоприятной роли этих простейших в поддержании патологического процесса. Некоторые исследователи обнаруживали трихомонад в мокроте больных легочными заболеваниями, а также в удаленных хирургическим путем бронхоэктазах и абсцессах легких. Все это заставляет обратить внимание на необходимость более широкого применения лабораторных методов исследования с целью выявления ротовых трихомонад в стоматологических и терапевтических медицинских учреждениях.

Трихомонад обнаруживают при микроскопии нативных или окрашенных мазков из соскоба ротовой полости (с зубов, десен, из очагов вос­паления и нагноения), в бронхиальной слизи и мокроте. Выявляемость увеличивается с применением методов посева на питательные среды.

Влагалищная трихомонада имеет грушевидное тело длиной 14—30 мкм (см. рис. 12).

Рис № 12. Трихомонада влагалищная

I – мазок на культуры,II- мазок из влагалища, III- мазок из влагалища ( окраска метиленовым синим) а- трихомонада: 1 ядро, 2 базальные тельца, 3 передние жгутики, 4 ундулирующая мембрана, 5 аксостиль, 6 парабазальная нить, 7 лейкоциты. в – эпителиальные клетки.

На переднем конце тело имеет 4 жгутика и ундулирующую мембрану, доходящую только до середины тела. Ближе к переднему концу располагается ядро. Сквозь все тело проходит осевая нить (аксостиль), выступающая на заднем конце в виде шипика. Цитоплазма содержит вакуоли. Цист не образует, во внешней среде быстро погибает. Играет заметную роль в патологии мочеполовой системы, особенно у женщин. Наблюдается и длительное бессимптомное носительство, чаще у мужчин. Основными симптомами заболевания, которое называется мочеполовым трихомонозом, являются зуд, боль, жжение, серозно-гнойные выделения (бели).

Трихомонады этого вида передаются лишь половым путем. Иногда высказываемое мнение о том, что трихомонады могут переселиться во влагалище из кишечника, неверно, так как кишечная и влагалищная трихомонады — это раз­ные виды с различными требованиями к условиям среды обитания. Диагноз ставят при обнаружении трихомонад в выделениях мочеполовых путей методом микроскопии нативных или окрашенных по Романовскому мазков

Диагностика.

Исследование выделений мочеполовых путей.

При воспалительных заболеваниях мочеполовых путей обязательно исследование на наличие влагалищных трихомонад.

Патологические выделения у женщин берут для исследования с помощью влагалищных зеркал и тампона со слизистой оболочки влагалища или из его заднего свода, а при обилии выделений — с наружных половых органов или с пальца резиновой перчатки после осмотра больной врачом.

Из уретры получают материал с помощью специальной ложечки, которую вводят до сфинктера.

У мужчин до мочеиспускания из уретры выдавливают каплю выделений. Для исследования мочевого пузыря мочу получают катетером и микроскопируют осадок после ее центрифугирования.

Во всех случаях 1—-2 капли выделений необходимо сразу же поместить в каплю изотонического раствора хлорида натрия на предметном стекле, накрыть покровным стеклом и исследовать при среднем увеличении (Х40, х10) с сухой системой.

В препарате, приготовленном указанным способом, вследствие быстрого высыхания подвижность трихомонад вскоре прекращается. Поэтому рекомендуют готовить препарат по типу “висячей капли”. В получающейся при этом влажной камере, где благодаря вазелиновой прокладке создается герметичность и замедляется высыхание препарата, подвижность трихомонад может наблюдаться иногда в течение часа. Это дает возможность готовить препараты в процедурном кабинете и направлять их в лабораторию (в холодное время года препараты надо доставлять в утепленном биксе).

В нативном препарате трихомонады легко отличаются от лейкоцитов и других клеток по движению, а также по наличию жгутов и ундулирующей мембраны. Более четко трихомонады видны при исследовании в темном поле или при фазово-контрастной микроскопии. В несвежем или подсохшем мазке трихомонады быстро прекращают свое движение, и в таком случае их определение становится практически невозможным.

Для диагностики трихомонадного поражения из исследуемого материала в процедурном кабинете готовят мазки и направляют в лабораторию, где их после подсушивания фиксируют и красят по Романовскому.

В окрашенных препаратах достаточно четко выявляются особенности морфологии трихомонад, что наряду с неограниченным временем исследования (в противоположность нативному мазку, где сроки доставки и микроскопии огра­ничены временем сохранения подвижности трихомонад) делает этот метод достаточно удобным для практических условий.

Окраска по Романовскому дает лучшие результаты в модификации Н. А. Цагикян (1954). Для этого фиксированный тонкий мазок красят 40 мин краской следующего состава: воды дистиллированной 100 мл, 1% раствора карбоната натрия 15 капель и краски Романовского 4 мл. По указанной модификации более четко красятся жгутики, трихомонады становятся хорошо различимыми. Ядра окрашиваются в фиолетово-рубиновый или фиолетовый цвет, цитоплазма—в голубой, жгутики и некоторые другие структурные образования — в розово--красный.

Повышению эффекта лабораторного исследования способствует просмотр нативных и окрашенных препаратов.

Список используемой литературы.

1.   Генис Д.Е. Медицинская паразитология, М. «Медицина», 1985 г

2.   Воробьев А.А. Микробиология и иммунология, М. «Медицина», 1999 г.

3.   Коротеев А.И. Медицинская микробиология, иммунология и вирусология, С-П., 1998 г.

4.   Золотницкий В.С. Руководство к практическим занятиям по эпидемиологии и паразитологии, М. «Медицина», 1975 г.

5.   Слюсарев А.А. Биология с общей генетикой, М. «Медицина», 1978 г.

6.   Чернес Ф.К. Микробиология, М. «Медицина», 1987 г.

7.   Ярыгин В.Н. Биология, М. «Медицина», 1980 г.

Страницы: 1, 2