Изучение токсического влияния кадмия на активность аминотрансфераз у потомства белых крыс
Таким образом,
трансаминазы играют важную роль в азотистом обмене, участвуют в биосинтезе
аминокислот. Биологический смысл реакций переаминирования аминокислот состоит в
том, чтобы объединить аминогруппы распадающихся аминокислот в составе молекул
одного типа аминокислоты, а именно глутаминовой /31/.
Трансаминазы относятся к
универсально-распространенным ферментам. В тканях различных органов содержится
значительное количество трансаминаз, в сотни и тысячи раз превышающее уровень
активности их в сыворотке крови. При электрофорезе они мигрируют с L - и γ - глобулинами.
Особенно высокой активностью АСТ (КФ.2.6.1.1.) отличаются сердце, печень,
мышечная ткань, почки, поджелудочная железа (перечень представлен в порядке
убывания активности АСТ). АЛТ (КФ.2.6.1.2.) в наибольших количествах
обнаруживается в печени, в связи с этим ее называют печеночной трансаминазой,
затем в поджелудочной железе, сердце, скелетных мышцах.
Значительные различия в
активности трансаминаз в отдельных органах и в сыворотке крови определяют его
важное клиническое диагностическое значение, так как при поражении ткани
возникает резкий скачок уровня активности трансаминаз в крови. Наибольшее
значение представляет повышение активности АСТ при инфаркте миокарда. Степень
повышения отражает массовость поражения сердечной мышцы и тяжесть инфаркта.
Характерна динамика активности АСТ при инфаркте миокарда: начало подъема -
через несколько часов после возникновения заболевания, максимальный подъем – к
концу первых суток, нормализация возможна в течение первой недели болезни. При
других заболеваниях сердца повышение активности АСТ либо не происходит, либо
носит умеренный характер. Однако активность АСТ повышается и при поражении
других органов и тканей. Многие авторы склонны рассматривать определение АСТ
как ценный тест при проведении дифференциальной диагностики между инфарктами
сердца и легких. Основанием к этому служит значительно более высокая (в 50 раз)
активность фермента в мышце сердца, в сравнении с тканью легкого. Активность
трансаминаз в сыворотке крови является одной из наиболее ценных и самым
распространенным в клинической практике показателем поражения печени,
характеризующие протекающие в ней цитолитические процессы /37/.
Повышение активности
аминотрансфераз, и, прежде всего АЛТ, выявляется уже в ранний, инкубационный,
преджелтушный период вирусного гепатита, что имеет принципиальное
эпидемиологическое значение для выявления больного еще до появления желтухи. В
результате значительного повышения активности АЛТ у больных вирусным гепатитом
снижается коэффициент Де Ритиса (АСТ: АЛТ) ниже 1 при норме 1 – 3, а при остром
инфаркте миокарда, напротив, резкое возрастание этого коэффициента /38/.
При хронических гепатитах
и циррозах печени соотношение трансаминаз меняется, и коэффициент повышается
выше нормы. Важно иметь в виду, что механические желтухи (непроходимость
желчных протоков в связи с желчекаменой болезнью или опухолью) не
сопровождаются выраженным повышением трансаминазной активности. Возможно
повышение активности трансаминаз при воспалительных заболеваниях различных
органов и тканей, при мышечных дистрофиях и т. д. /37,38/.
Таким образом, в
настоящее время установлено, что переаминирование является весьма важным и
распространенным процессом биологического распада и синтеза аминокислот; он
протекает в различных тканях животных, растений и в микроорганизмах. Поэтому
исследование этого процесса имеет большое фундаментальное и прикладное
значение.
2. Материалы и методы
2.1 Экспериментальная
часть
2.1.1
Экспериментальные животные
Эксперимент проводился на
самках белых беспородных крыс средней массы 250-300 г. Животные подвергались
токсическому действию азотнокислого кадмия (Cd(NO3)2) во время
лактации. Введение нитрата кадмия производилось самкам per os в течение 10 дней (с 1 по 10 день после рождения потомства)
в дозах 0,5 мг/кг и 2 мг/кг /39/. По достижении потомством экспериментальных
животных четырехмесячного возраста их декапитировали и производили отбор
органов и тканей для определения активности АСТ и АЛТ.
В качестве контроля
использовали животных, которым в период лактации вводили в соответствующем
объеме физиологический раствор.
2.1.2 Подготовка биологического
материала
2.1.2.1 Подготовка
сыворотки крови
После декапитации
животных кровь собирали в гепаринизированные пробирки и для получения сыворотки
подвергают центрифугированию, при 3000 об/мин, в течение 15 минут. После
центрифугирования получали сыворотку, не содержащую форменных элементов крови.
Затем отбирали сыворотку в пробирки, и производили определение активности АСТ и
АЛТ методом Райтмана – Френкеля/40/ с помощью стандартных наборов реактивов.
2.1.2.2 Подготовка
гомогенатов тканей и органов
Извлеченные органы
(печень, головной мозг, сердце, почки) отмывали от крови физиологическим
раствором, взвешивали 1-2 грамма ткани, измельчали ножницами и растирали в
ступке. Все операции производили на холоду. Затем добавляли среду выделения
(0,005 N Tris, 0,1 N KСl, pH7,4) в отношении
1: 50 для головного мозга, сердца и почек, и 1:100 – для печени. Полученные
гомогенаты переносили в центрифужные пробирки и центрифугировали при 4500
об/мин 10 минут. После центрифугирования супернатант переносили в другие пробирки,
а осадок выбрасывали. Далее в супернатанте производили определение активности
АСТ и АЛТ методом Райтмана – Френкеля /40/ при помощи стандартных наборов
реактивов.
2.2. Определение активности аминотрансфераз методом Райтмана – Френкеля
АСТ в присутствии L - кетоглутарата катализирует реакцию
переаминирования L - -аспартата с
образованием оксалоацетата, который декарбоксилируется до пирувата /41/:
L – кетоглутарат + L - аспартат → L – глутамат + оксалоацетат →
ПВК
АЛТ в присутствии L – кетоглутарата катализирует реакцию
переаминирования L – аланина с
образованием пирувата /41/:
L – кетоглутарат + L - аланин → L – глутамат + ПВК
Пируват с 2,4 –
динитрофенилгидразином (2,4 - ДНФГ) в щелочной среде образует окрашенный
гидразон, интенсивность окраски которого прямо пропорциональна активности АСТ и
АЛТ.
2.2.1 Определение активности
аспартатаминотрансферазы и аланинаминотрансферазы в сыворотке крови
В обычные пробирки
наливали 0,5 мл субстрата (L –
аспартат (L - аланин) 0,1 моль/л, L – кетоглутарат 2 ммоль/л, фосфатный
буфер 0,1 моль/л) и 0,1 мл сыворотки крови. Параллельно ставили контрольные
пробы, в которые не добавляли сыворотку. Пробы тщательно перемешивали и
инкубировали в течение 1 часа – АСТ и 30 минут – АЛТ при 37С на водяной бане.
После этого к опытным и контрольным пробам приливали по 0,5 мл раствора 2,4 –
ДНФГ. В пробирки с контролем только после добавления 2,4 – ДНФГ приливали 0,1
мл сыворотки крови. Через 20 минут (20-25 оС) в пробирки приливали
по 5 мл 0,4 моль/л раствора NaOH,
хорошо перемешивали и через 5-10 минут фотометрировали против холостой пробы в
интервале длин волн 500-560 нм (opt
537нм) в кюветах толщиной 1см.
Расчет активности
ферментов в сыворотке крови производили по калибровочному графику.
Каталитическую активность АСТ(АЛТ) рассчитывали в мкмоль/(с·л) по формуле:
каталитическая концентрация АСТ(АЛТ)= (Епр – Ек)К, где К – коэффициент
рассчитанный по калибровочному графику: К=С/Е, Епр – экстинция пробы, Ек –
экстинция контроля.
Калибровочный график для
определения активности аминотрансфераз строили таким образом, чтобы в пробах
находилось от 0,05 до 0,30 мл стандартного раствора пирувата. К пробам,
содержащим от 0,5 до 0,25 мл субстрата (0,05; 0,10; 0,15; 0,20; 025; 0,30 мл
пирувата), добавляли 0,5мл раствора 2,4 – ДНФГ, инкубировали при комнатной
температуре в течение 20 минут. Затем во все пробирки приливали по 5 мл 0,4 Н NaOH, хорошо перемешивали и через 30
минут в пробирках № 2-6 измеряли оптическую плотность при 537 нм против
раствора в пробирке № 1. Калибровочный график строили, откладывая на оси
ординат значения оптической плотности для каждой пробы, а на оси абсцисс –
соответствующие им значения активности АСТ и АЛТ.
2.2.2 Определение активности
аспартатаминотрансферазы и аланинаминотрансферазы в гомогенатах органов
В пробирки наливали 0,1
мл разбавленного гомогената тканей печени, головного мозга, сердца, почек и 0,5
мл субстрата (субстрат предварительно нагревали на водяной бане до 37 оС).
Параллельно ставили контрольные пробы, в которые не добавляли субстрата. Пробы
хорошо перемешивали и инкубировали в течение 1 часа при 37 о С на
водяной бане. После этого к опытным и контрольным пробам прибавляли по 0,5 мл
раствора 2,4 – ДНФГ. В пробирки с контролем только после добавления 2,4 – ДНФГ
приливали 0,5 субстрата. Пробы оставляли на 20 минут при комнатной температуре,
затем во все пробирки приливали по 5 мл 0,4 Н NaOH, тщательно перемешивали и через 30 минут измеряли
оптическую плотность при 505 нм, в кюветах с толщиной поглощающего слоя 1 см.
Расчет активности
ферментов в гомогенатах органов производили по калибровочному графику.
Каталитическую активность АСТ(АЛТ) рассчитывали в мкмоль/(с·л) по формуле:
АСТ(АЛТ) = (Епр- Ек)К, где К – коэффициент рассчитанный по калибровочному
графику: К=С/Е, Епр - экстинция пробы, Ек – экстинция контроля.
Калибровочный график для
определения аминотрансфераз в гомогенатах тканей строили так же, как для
сыворотки крови. Для расчета активности ферментов учитывали все разведения
гомогената и выражали в пересчете на 1 грамм ткани (мг белка).
Все экспериментальные
группы содержали от 7 до 9 животных, полученные данные были подвергнуты
статистической обработке. Достоверность различий между группами оценивали с
учетом критерия Стюдента, в соответствии с общепринятой методикой /42/.
Результаты и обсуждение
Трансаминазы являются
важнейшими ферментами обмена веществ. Аспартатаминотрансфераза (АСТ) и
аланинаминотрансфераза (АЛТ) - близкие по действию ферменты, при участии
которых в организме человека осуществляется межмолекулярный перенос аминогрупп
с аминокислот на кетокислоты. Этот процесс - трансаминирование - ответственен
за синтез и разрушение отдельных аминокислот в организме. В процессе
переаминирования, осуществляют связь углеродного и белкового обмена /36/. В
связи с этим, изучение влияния ионов кадмия как распространенного
экотоксиканта, принадлежащего к группе тяжелых металлов, представляет
несомненный интерес.
В ходе исследования активности аланинаминотрансферазы
(КФ.2.6.1.2.) и аспартатаминотрансферазы (КФ.2.6.1.1.) были получены следующие
результаты.
Таблица 1- Активность
аланинтрансаминазы в сыворотке крови и гомогенатах органов 4-х месячных самок
крыс подвергшихся хроническому действию кадмия в неонатальный период
Группа
|
Сыворотка
(М±m)
|
Печень
(М±m)
|
Мозг
(М±m)
|
Сердце
(М±m)
|
Почки
(М±m)
|
контроль
|
0,003±
0,0015
|
3,0±0.2
|
0.65±0.05
|
0,094±
0,022
|
1,05±0.25
|
Кадмий 0,5 мг/кг
|
0,008±
0,0005
|
1,5±0.6
|
0.55±0.1
|
0,094±
0,004
|
0.4±0.1
|
Кадмий 2 мг/кг
|
0,001±
0,0003
|
1,6±0.3
|
0.55±0.15
|
0,17±
0,0037
|
0.3±0.15
|
В результате
эксперимента было установлено снижение активности АЛТ в гомогенате печени в
выбранных дозах в 2 раза (р<0,003) по отношению к контролю, как показано в
таблице1 и на рисунке Б.1.
У самок опытной группы
в сыворотке крови происходило увеличение достоверное увеличение активности АЛТ
в группе 0,5 мг/кг в 2,7р (р<0.02) и в группе 2 мг/кг в 3 раза (р<0,001)
таблица 1, рисунок А.1.
В гомогенате мозга нами
не было выявлено достоверных различий в изменении активности АЛТ, хотя
наблюдалась тенденция к её снижению, что отражено в таблице 1 и на рисунке В.1.
В гомогенате почек при
дозе 0,5 мг/кг активность АЛТ уменьшилась в 2,5 раза (р<0,004) по отношению
к контролю, а при дозе 2 мг/кг по отношению контролю уменьшилась более, чем в 3
раза (р<0,005) (таблица1,рисунок Д.1). Статистически достоверных
различий в активности фермента между дозой 0,5 мг/кг и 2 мг/кг выявлено не
было.
В гомогенате сердца
достоверных изменений активности АЛТ в дозах как 0,5 мг/кг, так и 2 мг/кг не
наблюдалось (таблица 1 Приложение Г.1).
В работе также было
изучено изменение активности аспартатаминотрансферазы у потомства белых крыс,
подвергшихся токсическому действию солей кадмия в период лактации.
Активность АСТ в
гомогенате печени при дозе 0,5 мг/кг по сравнению с контролем достоверно не
изменилась, тогда как при дозе 2 мг/кг - повысилась более чем в 2,5 раза
(р<0,03) таблица 2, приложение Б.2.
При
введении экспериментальным животным нитрата кадмия в дозе 0,5 мг/кг, у их
потомства не наблюдалось статистически достоверного изменения активности АСТ в
сыворотке крови по сравнению с контролем. При дозе 2 мг/кг отмечено уменьшение
активности АСТ сыворотке примерно 6 раз (р<0,05) по сравнению с контролем.
Полученные данные представлены в таблице 2, рисунке А.2.
Таблица
2-Активность аспартаттрансаминазы в сыворотке крови и гомогенатах органов 4-х
месячных самок крыс подвергшихся хроническому действию кадмия в неонатальный
период
Группа
|
Сыворотка
(М±m)
|
Печень
(М±m)
|
Мозг
(М±m)
|
Сердце
(М±m)
|
Почки
(М±m)
|
контроль
|
0,02±
0,0075
|
1,9±0,5
|
1,7±0,3
|
0,14±0,03
|
0,7±0,15
|
Кадмий 0,5 мг/кг
|
0,009±0,004
|
2,2±0,7
|
1,85±0,7
|
0,2±0,02
|
0.8±0,2
|
Кадмий 2 мг/кг
|
0,003±0,001
|
4,8±1,2
|
3,25±0,65
|
0,15±0,05
|
1,6 ±0,25
|
В таблице 2,
рисунке В.2 показано, что гомогенате мозга при дозе 0,5 мг/кг активность АСТ
достоверно не изменилась (р<0,84) по сравнению с контролем. Введение
лактирующим крысам нитрата кадмия в дозе 2 мг/кг привело к увеличению
активности АСТ в гомогенате мозга потомства почти в 2 раза (р <0,05) по
отношению к контролю.
При изучении токсического
действия ионов кадмия на потомство белых крыс было обнаружено, что в гомогенате
почек при дозе 0,5 мг/кг активность АСТ по сравнению с контролем достоверно не
изменялась (р<0,68) (таблица 2, рисунок Д.2). При дозе
2 мг/кг активность АСТ увеличилась 2,3 раз (р<0,02 по сравнению с контролем)
(таблица2, рисунок Д.2).
Определение активности
аспартатаминотрансферазы в гомогенате сердца показало увеличение активности 1,4
раза (р<0,02) по сравнению с контрольными значениями при дозе 0,5 мг/кг.
Увеличение дозы токсиканта до 2 мг/кг не приводило к статистически достоверным
изменениям активности фермента по отношению к контролю таблица 2, рисунок Г.2.
Полученные в результате
эксперимента данные можно объяснить следующим образом: Печень и почки являются
органами мишенями при кадмиевой интоксикации выявленное уменьшение активности
АЛТ в гомогенате печени можно объяснить тем что, кадмий повреждает клетки
печени (гепатоциты), что сопровождается выходом фермента в кровоток /44/.
Поскольку максимальное количество АЛТ содержится в печени /54/, то при
поражении клеток печени активность АЛТ в крови возрастает, хотя АЛТ является
внутриклеточным ферментом, и его содержание в сыворотке крови здоровых людей
невелико /41,44/. Поэтому определение активности фермента в сыворотке крови
широко используется для диагностики болезней печени.
В мозге и сердце нами не было
выявлено достоверных изменений в активности АЛТ, поскольку АЛТ является
маркером периферической зоны катаболизма /55/, и его содержание в этих тканях
мало, по сравнению например с печенью, изменение активности данного фермента не
может быть индикатором тяжёлых нарушений происходящих в них, что мы не можем
сказать об активности АСТ, которая повышалась в этих органах.
Наблюдаемое нами уменьшение
активности АЛТ в почках может быть следствием того, что происходит ингибирование
данного фермента ионами кадмия, можно предположить, что реакция
переаминирования аланина при этом протекает медленнее, что приводит к снижению
образования глутамата, который является одним из основных участников системы
обезвреживания аммиака в организме. В результате в организме может происходить
увеличение содержания аммиака в клетках, который является токсичным для
организма и должен обезвреживаться, в этом принимает участие фермент АСТ (см.
ниже).
Второй фермент, активность которого
мы исследовали –АСТ - ключевой фермент обмена веществ, именно он обеспечивает
поступление субстратов в цикл трикарбоновых кислот (ЦТК) /55/, занимая
«центральную» роль в метаболизме. Субстраты этого фермента: аспартат, глутамат,
пируват и α -кетоглутарат являются самыми древними и присутствуют у всех
биологических объектов, занимая ключевую роль в обмене веществ. Значительная
активность АСТ обеспечивает интенсификацию как поступления метаболитов в ЦТК,
так и ускоряет работу последнего, что и ведёт к усилению окислительного фосфорилирования
/47/.
В ходе нашего исследования было
обнаружено увеличение активности АСТ в печени. Это увеличение можно объяснить
тем, что в печени происходит усиленный синтез этого фермента, это может быть
связано с тем, что происходит распад белков под действием ионов кадмия, что
увеличивает содержание свободных аминокислот в организме, это «субстрат» для
трансаминирования /46/. Снижение этого фермента в сыворотке крови говорит о
связывании фермента по двум его активным центрам с его SH
- группами, что наблюдается в значительном снижении активности /49/.
Увеличение активности АСТ в мозге,
возможно, является компенсаторным на уменьшение синтеза глутамата в результате
снижения скорости реакции катализируемой АЛТ /43/. Уменьшение синтеза глутамата
приводит к повышению уровня аммиака в крови, который способен проникать через
гематоэнцефалический барьер в головной мозг, где оказывает нейротоксический
эффект /43/. Аммиак может усиливать нейротоксический эффект меркаптанов и
короткоцепочечных жирных кислот концентрация которых может быть повышена в
клетках печени при их поражении /49/. В астроцитах мозга аммиак обезвреживается
в результате глутаматсинтазной реакции с образованием глутамина. Образование
глутамина в астроцитах приводит к оттоку глутамата, который в результате
усиления активности АСТ частично восстанавливает расход глутамата /55/. Когда
происходит отток глутамата из малат-аспартатного челнока митохондрий происходит
снижение синтеза АТФ, которую астроцит использует не только для внутренних
потребностей, но и для снабжения ею нейронов, что приводит к
гипоэнергетическому состоянию ЦНС. Увеличение активности АСТ приводит к
увеличению образования глутамата, ответственного за связывания аммиака.
Частичное обезвреживание аммиака происходит за счёт синтеза аспарагина из
аспартата, являющимся одним из субстратов реакции трансаминирования /48/. Как
было отмечено, отток глутамата сопровождается снижением синтеза АТФ что
приводит к гипоэнергетическому состоянию, и это не может не изменить активности
другого фермента ответственного за связывание аммиака в организме –
глутаматдегидрогеназы, являющимся регуляторным механизмом обмена аминокислот.
Понижение концентрации аденозиндифосфата (АДФ) активирует этот фермент, т. е.
низкий энергетический уровень в клетках стимулирует разрушение аминокислот с
образованием a - кетоглутарата, часть которого связывается с
аммиаком, а часть поступает в ЦТК как энергетический субстрат. Клетки мозга
нуждаются в притоке энергии, они чувствительны к токсическому воздействию
аммиака, в мозге помимо повышения активности АСТ существует множество
механизмов обеспечивающих нормальное функционирование этой ткани.
Повышение активности АСТ в почках,
возможно, связано с удалением ионов аммония образовавшегося при распаде белков,
дезаминировании аминокислот /47,55/
Увеличение активности АСТ при
заболеваниях сердца является диагностическим признаком в клинической практике
/41/. Повышение активности АСТ в результате интоксикации, связано с адаптивным
синтезом фермента /55/; возможно связано с необходимостью удаления избытков
ионов аммония при поражении сердечной мышцы /50/.
В результате нашей работы
наблюдалось увеличение активности АСТ и уменьшение активности АЛТ это может
происходить и на оборот; возможно, это тонкий механизм, который организм
исполняет при усилении или угнетении тех или иных процессов метаболизма, тем
самым, адаптируя организм к неблагоприятным условиям. Как видно из результатов
обсуждения эти ферменты играют не последнюю роль и в обезвреживании аммиака в
организме, помимо своего основного участия в процессах обмена аминокислот.
Выводы
1.
Показано, что
введение лактирующим самкам крыс азотнокислого кадмия в дозе 0,5 мг/кг вызывает
повышение активности аланинаминотрансферазы в сыворотке крови, понижение активности
- в гомогенатах печени и почек.
2.
Установлено, что в дозе 2 мг/кг
увеличения активности аланинаминотрансферазы не наблюдалось, тогда как в
гомогенатах печени и почек она уменьшалась.
3.
Выявлено
повышение активности аспартатаминотрансферазы при введении экспериментальным
животным азотнокислого кадмия в дозе 0,5 мг/кг в гомогенате сердца.
4.
Установлено повышение активности
аспартатаминотрансферазы при дозе 2 мг/кг в гомогенатах печени, головного
мозга, почек и уменьшение в сыворотке крови.
Список использованных
источников
1.
Ярушкин В.Ю.
Тяжелые металлы в биологической системе мать-новорожденный в условиях
техногенной биогеохимическойпровинции // Гигиена и санитария – 1992. - №6. – с.
13-15.
2.
Ревич Б.А.
Экологическая эпидемиология, М.:Академия.,2004.– 206 с.
3.
Wloch
S. Dunamics of morphological and cytochtmical changel in the placenta following
cadmium chloride intoxication // Ginecol. Pol. – 1992. – Vol. 63 - №6 – P. 264 – 275.
4.
Corpas
I., Antonio M T. Study of alteration produced by cadmium and cadmium/leand
administration during gestational and early lactation periods in the
reproductive organs of the rat // Ecotoxicol. Environ. Saf. – 1998. – Vol. 41 – №2 – P. 180-188.
5.
Рапопорт С.М.
Медицинская биохимия., М.:Медицина., 1966. – 143 с.
6.
Алабастер Дж.
Критерии качества воды для пресноводных рыб. М.: Легкая и пищевая
промышленность., 1984. – 344 с.
7.
Куценко С.А.
Основы токсикологии., Санкт – Петербург., 2002. – 390 с.
8.
Ликулова И.В.,
Белова Е.А. Специфическое действие кадмия при перроральном поступлении в
организм с водой. // Гигиена и санитария. – 1987. - №6. – с. 70-74.
9.
Авцын А.П. и др.
Микроэлементозы человека (этиология, классификация, органопатология).,
М.:Медицина, 1991. – 564 с.
10.
Ambrosi
L., Lomonte C., Еtal Nephropathy induset in
Nephrology, bari, Itali, apr. 1990. – 100 p.
11.
Franchini
I., Mutti A. Tubulointerstiliar nephropaties by industrial chemicals //
Proceedings of the 4th Bari seminar in Nephrology, Bari., 1990. – p.
119-127.
12.
Войнар А.И.
Биологическая роль микроэлементов в организме животных и человека., М., 1960. –
245 с.
13.
Дюга Г., Пенни К.
Биологическая химия. Химические подходы к механизму действия ферментов., М.,
1983. – 460 с.
14.
Османов И.М. Роль
тяжелых металлов в формировании заболеваний органов мочевой системы //
Российский вестник перинетологии и педиатрии. – 1996. - №1. – с. 36-40.
15.
Коротков С.А.,
Глазунов В.В., Действие гидрофобного органического комплекса кадмия на ионную
проницаемость митохондриальной мембраны и дыхание митохондрий печени крыс. //
Биохимические мембраны. – 1996. - №2. – с. 178-183.
16.
Трахтенберг И.М.,
Иванова Л.А. Тяжелые металлы и клеточные метаболизмы. // Медицина труда и
промышленная экология. – 1999. - №11. – с. 28-32.
17.
Нурмухамбетов
А.Н., Кащеева Е.П. Индукция кадмием перекисного окисления липидов в тканях
белых крыс и ее профилактика аскорбиновой кислотой. // Гигиена и санитария. –
1989. - №3. – с. 77-78.
18.
Скальный А.В.
Микроэлементы человека (диагностика и лечение), М.: КМК., 1999. – 49 с.
19.
Калоус В.,
Павличек З. Биофизическая химия., М.: Мир, 1985. – 446 с.
20.
Gunarson
D., Nordberg G., Cadmium – induced decrement of the receptor expression and c
AMP levels in the testis of rats // Toxicology. – 2003. – Feb. 1:183(1-3) – p.
57-63.
21.
Литвинов Н.Н. К
вопросу о дозоэффективной зависимости эмбриотоксического действия хлористого
кадмия. // Гигиена и санитария. – 1989. - №4. – с.86.
22.
Мищенко В.П.
Токсичные металлы и беременность. // Российский вестник перинатологии и
педиатрии. – 1997. - №6. – с. 59.
23.
Antonio
M. T., Lores N. Pb and Cd poisoning during development alters cerellar and
striatal function in rats // Toxicjlogy. – 2002. – Iul. 1:176 (1-2) – p. 59-66.
24.
Кретович В.Л.
Введение в энзимологию., М., 1986. – 250 с.
25.
Майстер А.
Биохимия аминокислот. / Под. ред. А. Е. Браунштейна., М.: Издательство
иностранной литературы., 1961. – 240 с.
26.
Филиппович Ю.Б.
основы биохимии., М., 1985. – 130 с.
27.
Катунума Н. Химия
и биология пиридоксалевого катализа., М., 1968. – 170 с.
28.
Торчинский Ю.М. Молекулярный
механизм энзиматического трансаминирования: 40-е Баховское чтение., М., 1987. –
70 с.
29.
Диксон М., Уэбб
Э. Ферменты.,(том 2), М., 1982. – 450 с.
30.
Берхард С.
Структура и функции ферментов., М., 1971. – 380 с.
31.
Фершт Э.
Структура и механизм действия ферментов. / Пер. с анг. Ю.Б. Гребеньщикова., М.,
1980. – 430 с.
32.
Аминокислоты, их
производные и регуляция метаболизма. / Под. ред. З.Г. Броновицкой.,
Ростов-на-Дону., 1983. – 124 с.
33.
Мецлер Т.
Биохимия. Химические реакции в живой клетке.(том 2), М., 1980. – 270 с.
34.
Березов Т.Т.,
Коровкин Б.Ф. Биологическая химия., М.:Наука. – 2004. – 540 с.
35.
Якубке Х.Ф.,
Аминокислоты, пептиды, белки. М., 1985. – 340 с.
36.
Функциональная
активность ферментов и пути ее регуляции. / Под. ред. С.Е. Северина, Г.А.
Кочетова, М.: Издательство МГУ, 1981. – 180 с.
37.
Анисимов А.А.
Медицинская энзимология., Горький., 1978. – 150 с.
38.
Коровкин Б.Ф.
Ферменты в жизни человека., М., 1972. – 270 с.
39.
Халимов С.З.
Сравнительная оценка эмбриотоксического действия различных соединений кадмия.
// Гигиена и санитария. – 1985. - №4. – с. 11-14.
40.
Reitman
S., Frankel A. Colorimetric methol for the deter mination of serum glutamic
oxaloacetic and glutamic pyruvic transaminases. – Amer. I Clin. Pathol. – 1957.
– №28. – p. 56-63.
41.
Комаров Ф.И.,
Коровкин Б.Ф. Биохимические исследования в клинике., М., 2001. – 215 с.
42.
Рокицкий П.Р.
Биологическая статистика., Минск., 1973. – 319 с.
43.
Немова Н.С.
Влияние аммиака и ацетилхолина на аспартат- и аланинаминотрансферазную
активность ткани головного мозга. // Вопросы медицинской химии. – 1966. - №5. –
с. 514-516.
44.
Покровский А.А.
Изменение активности сорбитдегидрогеназы, аланиаминотрансферазы и
фосфогексоизомеразы в плазме крови крыс при остром токсическом поражении печени.
// Вопросы едицинской химии. – 1967. - №5. – с. 511-515.
45.
Корчак В.И.
Активность аланинаинотрансферазы в сыворотке крови и печени в условиях
воздействия на крыс химических веществ. // Гигиена и санитария. – 1985ю - №8. –
с. 11-14.
46.
Мосс Д.В., Баттерворт
П.Д. Энзимология и медицина. М., 1978. – 365 с.
47.
Талакин Ю.Н. О
некоторых биохимических изменениях в организме при воздействии низких
концентраций тяжелых металлов. // Гигиена и санитария. – 1973. - №9. – с.
17-19.
48.
Люблина Е.И,
Минкина Н.А. Адаптация к промышленным ядам как фаза интоксикации., Ленинград.,
- 1971. – 567 с.
49.
Магарламов А.Г.
Аспартат- и аланинаминотрансферазная активность в печени и сыворотке крови крыс
при парентеральном азотистом питании на фоне белкового голодания. // Украинский
биохимический журнал. – 1980. - №6. – с. 720-725.
50.
Мушина Е.В.
Изучение совместного биологического действия свинца и кадмия в эксперименте на
животных. // Гигиена и санитария. – 1989. - №9 – с.89-90.
51.
Охрименко С.М.,
Гурьева Н.Г. Адаптации ферментов липидного и азотистого обмена у крыс при
оксидативном стрессе, вызванном стрессе, вызванном солями кобальта и ртути //
Вестник Харьковского национального университета. – 2005. - №2. – с.56-60.
52.
Филимонов К.Р.
Лабораторная и инструментальная диагностика заболеваний внутренних органов. –
М.: Наука, - 1995. – 342 с.
53.
Kowalczyc
E., Koff A. Effect of anthocyanins on selected biochemical parameters in rats
exposed to cadmium // Acta Biochemica Polonica. – 2003. – Vol. 50. №2 – P.
543-548.
54.
Надинская М.Ю.
Печеночная энцефалопатия: патогенный подход к лечению. // Гостроэнтерология. –
2006. - №1. – с. 12-16.
55.
Силиванов М.П.
Клиническая биохимия.М.: Мир, 1984. – 543 с.
Страницы: 1, 2, 3
|
|