Фотосинтез как основа энергетики биосферы
Альдолаза затем осуществляет перенос трехуглеродного остатка
фосфодиоксиацетона на альдозу, в данном случае эритрозо-4-фосфат, в результате
чего синтезируется седо-гептулозо-1,7-дифосфат. Последний дефосфорилируется и
под действием транскетолазы из него и 3-ФГА образуются ксилулозо-5-фосфат и
рибозо-5-фосфат. Две молекулы ксилуло-зо-5-фосфата при участии
рибулозофосфатэпимеразы и одна молекула рибозо-5-фосфата с участием
рибозофосфатизомеразы превращаются в три молекулы рибулозо-5-фосфата, с
которого начинается новый цикл фиксации С02.
Из оставшейся неиспользованной 6-ой молекулы 3-ФГА под действием
альдолазы синтезируется (при повторении цикла) молекула фруктозо-1,6-дифосфата,
из которой могут образовываться глюкоза, сахароза или крахмал:
Таким образом, для синтеза одной молекулы глюкозы в цикле Кальвина
необходимы 12 NADPH и 18 АТР (рис. 7.1), которые поставляются в результате
фотохимических реакций фотосинтеза.
6.2 Цикл Хэтча-Слэка-Карпилова, его эволюционное значение.
Различные типы усвоения углекислого газа C4-растениями
В работах Л. А. Незговоровой (1956—1957 гг.), было установлено,
что при коротких экспозициях листьев кукурузы на свету 14С из 14С02
обнаруживается в аспарагиновой кислоте. В дальнейших исследованиях как
советских, так и зарубежных специалистов эти представления были развиты, что
привело к открытию C4-nymu углерода в фотосинтезе. Так, в 1960 г. Ю. С. Карпилов, а в 1963 г. И. А. Тарчевский и Ю. С. Карпилов представили данные о раннем
образовании яблочной кислоты в листьях кукурузы. Г. П. Корчак и др. впервые
показали, что дикарбоновые кислоты (яблочная и аспарагиновая) являются
первичными продуктами фиксации С02 у сахарного тростника. Затем эти соединения
через 3-ФГК и гексозофосфаты превращаются в сахара. Как новый тип фиксации С02,
принципиально отличающийся от цикла Кальвина, этот цикл впервые описали
австралийские ученые М. Д. Хетч и, К. Р. Слэк (1966). К группе растений с С4-путем
фотосинтеза относятся сахарный тростник, кукуруза, сорго и др. Листья этих
растений содержат два разных типа хлоропластов: хлоропласты обычного вида — в
клетках мезофилла и большое количество крупных хлоропластов, часто не имеющих
гран, — в клетках, окружающих проводящие пучки (обкладка). С02, диффундирующий
в лист через устьица, попадает в цитоплазму клеток мезофилла, где при участии
ФЕП-карбокси-лазы вступает в реакцию с ФЕП, образуя щавелевоуксусную кислоту
(оксалоацетат). Затем уже в хлоропластах оксалоацетат восстанавливается до
яблочной кислоты (малата) за счет NADPH, образующего в ходе световой фазы фотосинтеза.
Щавелевоуксусная кислота в присутствии NH4+ может превращаться также
в аспартат. Затем малат (или аспартат) переносится в хлоропласты клетки
обкладки сосудистого пучка, где он декарбоксилируется малик-энзимом
(малатдегидрогеназой декарбоксилирующей) до пирувата и С02.
Как уже отмечалось, в хлоропластах обкладки отсутствуют граны, а
следовательно, слабо представлена ФС II, необходимая для нециклического
транспорта электронов, однако в них в изобилии накапливается крахмал.
Объясняется это тем, что в хлоропластах обкладки используется поставляемый
малик-энзимом НAДФH, а также тот С02, который образовался при окислительном
декарбоксилировании малата (или аспартата). В этих хлоропластах в процессе
циклического фотофосфорилирования синтезируется большое количество АТР и
фиксация С02 осуществляется по типу цикла Кальвина. У некоторых растений с
С4-путем фотосинтеза (амарант, лебеда) яблочная кислота декарбоксилируется в
митохондриях клеток обкладки с восстановлением NAD.
Возникающий при расщеплении малата в хлоропластах клеток обкладки
пируват перемещается назад в хлоропласты клеток мезофилла, где может снова
превращаться в первичный акцептор С02 — ФЕП. Такая компартментация процессов
позволяет растениям с С4-путем осуществлять фотосинтез даже при закрытых
устьицах, так как хлоропласты клеток обкладки используют малат (аспартат),
образовавшийся ранее, как донор С02. С4-растения могут также использовать С02,
возникающий при фотодыхании. Закрывание устьичных отверстий в наиболее жаркое
время дня сокращает потери воды за счет испарения (транспирации). Не удивительно
поэтому, что к С4-растениям относятся многие виды засушливой тропической зоны.
Растения с С4-путем фотосинтеза, как правило, устойчивы к засолению.
Эффективность использования воды, т. е. отношение массы ассимилированного С02 к
массе воды, израсходованной при транспирации, у С4-растений зачастую вдвое
выше, чем у С3-растений. Таким образом, С4-растения имеют преимущества перед
С3-растениями в засушливых местах обитания благодаря высокой интенсивности
фотосинтеза даже при закрытых устьицах. Фиксация С02 с участием ФЕП и
образование малата (аспартата) служит как бы насосом для поставки С02 в
хлоропласты обкладки, функционирующие по С3-пути.
6.3 САМ-тип метаболизма. Потоки метаболитов в хлоропласт и из него
Суккуленты (роды Crassula, Bryophyllum и др.) также приспособились осуществлять
фотосинтез в условиях резко засушливого климата. Для них характерен суточный
цикл метаболизма С4-кислот с образованием яблочной кислоты ночью. В
соответствии с английским выражением Crassulacean Acid Metabolism (САМ) этот тип фотосинтеза часто сокращенно называют САМ-метаболизм.
Устьица этих растений днем обычно закрыты, что предотвращает потерю воды, и открываются
ночью. С02 поступает в листья, где при участии содержащейся в цитоплазме
ФЕП-карбоксилазы взаимодействует с фосфоенолпируватом, образуя оксалоацетат.
Источник ФЕП-карбоксилазы взаимодействует с фосфоенолпируватом, образуя
оксалоацетат. Источником ФЕП служит крахмал. То же самое происходит и с С02,
который освобождается в клетках в процессе дыхания. Образовавшийся оксалоацетат
восстанавливается под действием NADH-зависимой малатдегидрогеназы до яблочной кислоты, которая
накапливается в вакуолях клеток листа.
Это приводит к закислению клеточного сока в ночное время. Как и у
С4-растений, оксалоацетат может быть источником аспартата, однако этот путь
здесь менее выражен.
Днем в условиях высокой температуры, когда устьица закрыты, малат
транспортируется из вакуолей в цитоплазму и там декарбоксилируется при участии
малатдегидрогеназы декарбоксилирующей (малик-энзима) с образованием С02 и
пирувата. С02 поступает в хлоропласты и включается в них в цикл Кальвина,
участвуя в синтезе сахаров.
Таким образом, у растений с фотосинтезом по типу толстянковых
много общего с С4-путем фотосинтеза. Однако при САМ-метаболизме фиксация С02 с
образованием малата (ночью) и декарбоксилирование малата с высвобождением С02 и
пирувата (днем) разделены во времени. У С4-растений эти же реакции разграничены
в пространстве: первая протекает в хлоропластах мезофилла, вторая — в клетках
обкладки. При достаточном количестве воды ряд растений с метаболизмом по типу
толстянковых могут вести себя как С3-растения. В свою очередь некоторые
растения с С3-путем фотосинтеза при недостатке воды проявляют черты
САМ-метаболизма.
7 Фотодыхание, его значение. Сравнение фотодыхания у растений с
различными типами метаболизма углерода
В растительных клетках, содержащих хлоропласты, помимо С3- и
С4-путей фотосинтеза, осуществляется также фотодыхание, т. е. активируемый
светом процесс высвобождения С02 и поглощения 02, который значительно,
отличается от «темнового» дыхания митохондрий. Так как при этом первичным
продуктом является гликолевая кислота, то этот путь получил название гликолатного.
У некоторых С3-растений с малой эффективностью фотосинтеза интенсивность
фотодыхания может достигать 50% от интенсивности фотосинтеза.
Фотодыхание у С3-растений обычно усиливается при низком содержании
С02 и высоких концентрациях 02. В этих условиях РДФ-карбоксилаза в хлоропластах
может функционировать как оксигеназа, катализируя окислительное расщепление
рибулозо-1,5-дифосфата на 3-ФГК и 2-фосфогликолевую кислоту, которая затем
дефосфорилируется в гликолевую кислоту (рис. 7.1). Молекулы С02 и 02
конкурируют между собой в каталитическом центре РДФ-карбоксилазы: при
относительно высоких концентрациях С02 и низких 02 преобладает
карбоксилирование, тогда как высокие концентрации 02 и низкое содержание С02
благоприятствуют окислению, а следовательно, и образованию фосфогликолевой
кислоты. В том же направлении действует и повышение температуры.
Фотодыхание осуществляется в результате взаимодействия трех
органелл — хлоропластов, пероксисом и митохондрий (рис. 7.1). Гликолат из
хлоропласта поступает в пероксисому и там окисляется гликолатоксидазой до
глиоксилата. Возникающая перекись водорода устраняется каталазой пероксисомы.
Глиоксилат аминируется, превращаясь в глицин, причем в качестве донора аминогруппы
функционирует глутамат.
Глицин транспортируется в митохондрию. Здесь из двух молекул
глицина образуется серин и освобождается С02. Теперь цикл замыкается: серин
может снова поступать в пероксисому и там передать свою аминогруппу на пируват.
При этом из пирувата возникает аланин, из серина — гидроксипируват, который сразу
после этого восстанавливается в глицерат. Затем глицерат может снова попасть в
хлоропласты и благодаря фосфорилированию включиться в цикл Кальвина.
Последовательность реакций фотодыхания не обязательно образует
цикл. Гликолатный путь С3-растений может завершиться в митохондриях. Конечными
продуктами в этом случае является серин и С02. Освобождение С02 объясняет
почему нетто-фотосинтез (чистая продуктивность) при интенсивном фотодыхании
снижается (рис. 7.1).
У С4-растений С02, выделяющийся в результате фотодыхания,
перехватывается в клетках мезофилла, где из ФЕП и С02 образуются оксалоацетат и
малат. Затем малат «отдает» свой С02 хлоропластам обкладки, где функционирует
цикл Кальвина. В связи с этим становится понятным высокий нетто-фотосинтез
С4-растений.
Однако для чего же тогда нужно фотодыхание? Необходимо вспомнить,
что гликолатный путь приводит к синтезу глицина и серина, в пероксисомах
происходит восстановление NADP+; имеются косвенные данные о том, что в процессе образования
серина может генерироваться и АТР. Показано, что С3-растения, помещенные в
атмосферу с низким парциальным давлением 02 и высокой концентрацией С02, ведут
себя подобно С4-растениям, т. е. имеют низкий уровень фотодыхания.
Из всего сказанного можно сделать вывод, что термин фотодыхание
имеет лишь формальный смысл: 02 потребляется, С02 выделяется, однако в
функциональном плане к дыханию этот процесс прямого отношения не имеет.
Рис. 7.1
8 Эндогенные механизмы регуляции процесса фотосинтеза
Регуляция фотосинтеза осуществляется на уровне фотохимически
активных мембран, хлоропластов, клеток, тканей, органов и целого организма. Все
системы регуляции принимают участие в этом процессе.
Процессы в хлоропластах при переходе к фотосинтезу. При освещении листьев хлоропласты уже через несколько минут
начинают уменьшаться в объеме, становясь более плоскими (дисковидными).
Тилакоиды и граны сдвигаются и уплотняются. Фотоиндуцируемое сокращение
хлоропластов объясняется возникновением трансмембранных протонных градиентов и
изменением электрического потенциала мембран хлоропластов. Определенная степень
сжатия хлоропласта необходима для эффективной работы электронтранспортной цепи
и для ее сопряжения с образованием АТР. Транспорт протонов внутрь тилакоидов
приводит к подкислению их внутренней полости до рН 5,0—5,5 и одновременному
подщелачиванию стромы хлоропласта от рН 7,0 в темноте и до рН 8,0 на свету.
Вход ионов Н+ в тилакоиды сопровождается выходом из них в строму ионов Mg2 + .
Появление NADPH, ATP, 02, Mg2+ и изменение рН оказывают прямое и опосредованное влияние на
реакции фотосинтетического усвоения С02 в строме. Экспериментально показано,
что фиксация С02 изолированными хлоропластами практически не обнаруживается при
рН ниже 7,2, но достигает максимальных значений при рН 8,0. Причина этого
заключается в изменении активности ряда ферментов, имеющих оптимум рН в
слабощелочной среде: рибулозофосфаткиназы (рН 7,9), дегидрогеназы
фосфоглицеринового альдегида (рН 7,8), рибулозо-1,5-дифосфаткарбоксилазы (рН от
7,5 до 8,0), фруктозодифосфатазы (рН 7,5 — 8,5). Повышение рН стромы при
освещении хлоропласта приводит к значительному связыванию С02 в виде Н2С03 и
накоплению НСОз, из которого С02 освобождается с помощью карбоангидразы перед
карбоксилированием рибулозо-1,5-дифосфата.
АТР участвует в фосфорилировании рибулозо-5-фосфата и ФГК, а также
в реакциях, связанных с синтезом сахарозы и крахмала. NADPH необходим для
восстановления ФГК до ФГА и для образования малата из щавелевоуксусной кислоты.
Mg2+ нужен
для функциональной активности РДФ-карбоксилазы, он также принимает участие в
синтезе хлорофилла и белков.
Процесс фиксации С02 регулируется прежде всего светом.
Он активирует ряд ферментов цикла Кальвина: РДФ-карбоксилазу,
дегидрогеназу 1,3-дифосфоглицериновой кислоты, фруктозо-1,6-дифосфатфосфатазу,
седогептулозо-1,7-дифосфатфосфатазу и рибулозо-5-фосфаткиназу. Наиболее
многообразна регуляция функционирования ключевого фермента цикла Кальвина —
РДФ-карбоксилазы.
Помимо света, фермент активируется фруктозо-6-фосфатом, а
ингибируется 6-фосфоглюконатом и фруктозо-1,6-дифосфатом. 6-Фосфоглюко-нат
подавляет также активность завершающего цикл фермента —
рибулозо-5-фосфаткиназы. Наконец, продукт цикла фиксации С02 —
3-фосфоглицериновая кислота положительно влияет на синтез крахмала. Повышение
концентрации 02 в строме может привести к снижению интенсивности фиксации С02
за счет усиления фотодыхания.
Функциональные изменения в клетках
мезофилла. Хлоропласты большинства растений способны перемещаться в клетке в
зависимости от интенсивности и направления освещения. Сильный свет вызывает
отрицательный фототаксис хлоропластов: они уходят от света, концентрируясь на
боковых стенках клеток палисадной паренхимы; слабый свет вызывает положительный
фототаксис. Предполагают, что освещенный хлоропласт меняет свое положение в
клетке с помощью сократительных белков, связанных с оболочкой хлоропласта и
взаимодействующих с сократительными белками цитоплазмы.
Мощное воздействие на клетку, определяющее ее метаболизм,
оказывают образующиеся в хлоропластах ATP, NADPH и ассимиляты. При освещении отношение ATP/ADP в хлоропластах резко
возрастает и вследствие быстрого обмена энергетическими эквивалентами почти тотчас
же может воспроизводиться в цитоплазме, а через нее и в митохондриях. Так как
оболочка хлоропласта лишь в слабой степени проницаема для АТР, перенос в
цитоплазму высокоэнергетической фосфатной связи АТР осуществляется с помощью
челночного механизма в результате реакции восстановления-окисления между ФГК и
ФДА, так как скорость выхода триозофосфатов через мембраны оболочки хлоропласта
приближается к скорости свободной диффузии. Одновременно это приводит к
транспорту восстановительных эквивалентов (NADH).
Переносчиком высокого восстановительного потенциала NADPH может служить система
ЩУК-малат, каждый компонент которой легко проходит через мембраны, совершая
циклические перемещения между хлоропластом и цитоплазмой. В пользу этой
гипотезы говорит то, что в хлоропластах находятся NAD + - и NADP + -зависимые
малатдегидрогеназы.
Появление АТР и восстановительных эквивалентов в цитоплазме
приводит к активации на свету таких энергопотребляющих процессов, как синтез
жирных кислот, восстановление нитратов и сульфатов. Общеклеточные нужды могут
даже «отзывать» АТР с пути восстановления С02, конкурируя с реакциями цикла
Кальвина.
Уже в первые секунды фотосинтеза происходит выход ассимилятов в
цитоплазму. После кратковременного фотосинтеза с 14С02 в цитоплазме прежде
всего появляются меченые фосфотриозы — ФГК и ФДА, а затем [14С]
фруктозо-1,6-дифосфат. На изолированных хлоропластах показано, что оболочка
хлоропласта практически непроницаема для сахарозы. По-видимому, основным местом
синтеза сахарозы в клетке является не хлоропласт, а цитоплазма. На это
указывает также присутствие основного сахарозосинтезирующего фермента
сахарозофосфатсинтетазы и UDP-глюкозопирофосфорилазы преимущественно в цитоплазме.
Выход предшественников углеводов из хлоропластов в цитоплазму
совершается в виде ФГК, ФГА и ФДА. Дальнейшие превращения, ведущие к синтезу
гексозофосфатов и сахарозы, происходят уже в цитоплазме. Аналогичным
превращениям могут подвергаться триозофосфаты и в хлоропластах, вследствие чего
при достаточно интенсивном фотосинтезе в хлоропластах накапливается крахмал,
служащий резервом углеводов, предназначенных для экспорта в цитоплазму во
вторую очередь. Отложения крахмала часто бывают очень значительными (до 90% от
объема хлоропласта).
Выходящие из хлоропластов ассимиляты могут использоваться в самой
фотосинтезирующей клетке двумя путями: 1) в окислительно-восстановительных
процессах, что обычно заканчивается освобождением С02, 2) для увеличения массы
клетки в процессе ее роста и отложения запасных и вторичных веществ. Большая
часть ассимилятов транспортируется из фотосинтезирующих клеток листа в другие
органы и ткани.
Взаимодействие тканей листа при фотосинтезе. Под действием света изменения происходят не только в клетках
мезофилла. Свет выступает одним из важнейших факторов регуляции работы устьиц.
При включении света у большинства растений устьица открываются более широко, а
при выключении — закрываются. Исключение из правила — растения семейства
толстянковых, у которых ночью устьица открыты, а днем закрыты. На движения
устьиц влияет и концентрация С02: ширина устьичных щелей увеличивается при
снижении содержания С02 в межклетниках. Открывание устьиц под действием света
связано с работой фотосинтетического аппарата в замыкающих клетках. У
этиолированных растений свет не влияет на движения устьиц. В замыкающих клетках
на свету включается механизм Н +-насоса в плазмалемме, усиливается поглощение
К+ и синтез малата, в результате чего возрастает внутриклеточное осмотическое
давление и устьица открываются.
Увеличение степени открывания устьиц приводит к усилению
транспирации и, следовательно, к более интенсивному поступлению воды и веществ
по ксилеме из корней в листья, что необходимо для нормальной функциональной
активности клеток мезофилла.
Фотосинтетическая деятельность клеток мезофилла обогащает ткани
листа сахарами и другими продуктами фотосинтеза. В результате возрастает
функциональная активность проводящих пучков. Теоретически существуют два способа
транспорта ассимилятов к проводящим пучкам: по симпласту (через плазмодесмы и
цитоплазму последовательного ряда клеток) и по апопласту (по клеточным
стенкам). Однако у многих видов растений между клетками мезофилла и флоэмы
плазмодесмы развиты крайне слабо или совсем отсутствуют. В апопласте листовой
пластинки может находиться около 1/5 сахаров, содержащихся в листе, и
значительная доля свободных аминокислот. Клетки листовой паренхимы сравнительно
легко выделяют ассимиляты в наружную среду и относительно слабо их поглощают. Клетки
флоэмных окончаний, напротив, способны усиленно поглощать из внешних растворов
сахара и аминокислоты против концентрационного градиента с помощью
энергозависимых переносчиков. Есть основание считать, что, выходя из
паренхимных клеток листа в клеточные стенки, сахароза расщепляется находящейся
там инвертазой на гексозы (фруктозу и глюкозу), которые в проводящих пучках
вновь образуют сахарозу.
Страницы: 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7
|
|